Kit d’extraction d’ARN et d’ADN

ahmedaziz33

Purification de RNA/DNA kit micro (Rotation-colonne)

 

Offert dans deux tailles (20preps, 50preps), DP3301, DP3302

 

La purification du RNA/DNA de Bioteke kit micro fournit une méthode rapide pour l’isolement et la purification de l’ARN total et de l’ADN genomic séquentiellement d’un échantillon simple de cellules, de prélèvements de tissu (en particulier tissus fibreux de dur-à-extrait) ou de sang animaux cultivés. Tout le ARN et ADN genomic sont deux colonne épurée en moins de 30 minutes. Les fractions épurées d’ARN et d’ADN peuvent être éluées dans seulement 20 le  L. Ce kit est idéal pour les chercheurs qui sont intéressés à étudier le génome et le transcriptome d’un échantillon simple, comme pour des études du profilage de microRNA, de l’expression du gène comprenant le gène faisant taire des expériences ou des précipitations d’ADN messagère, études comportant la découverte de biomarker, et pour la caractérisation des variétés de cellule cultivées. La purification du RNA/DNA de Bioteke il est particulièrement utile pour les chercheurs qui isolent des macromolécules de façon précieuse, difficile obtenir kit micro ou les petits échantillons tels que des matériaux de biopsie ou des foyers simples des cultures cellulaires, car elle élimine la nécessité de fractionner l’échantillon. En outre, l’analyse sera plus fiable depuis l’ARN et l’ADN sont dérivées du même échantillon, éliminant de ce fait des résultats contradictoires. Les macromolécules purifiées sont de la plus grande pureté et peuvent être employées dans un certain nombre de différentes applications en aval.

 

Technologie de la purification de Bioteke

La purification est basée sur la chromatographie sur colonne de rotation. Le processus implique de lyser d’abord les cellules ou le tissu d’intérêt du tampon fourni SKP. Pour des tissus fibreux de dur-à-extrait (tels que le coeur et le muscle), une étape supplémentaire de digestion de la protéinase K est donnée pour la récupération maximum de l’ARN et de l’ADN. L’ADN dans le lysate est alors capturée et purifiée sur une colonne de micro de purification de gDNA. L’éthanol est alors ajouté au flowthrough de l’étape de purification d’ADN, et la solution est chargée sur une colonne de micro de purification d’ARN. La résine de Bioteke lie les acides nucléiques en quelque sorte qui dépend des concentrations ioniques, ainsi seulement l’ARN comprenant des microRNAs liera à la colonne tandis que les protéines sont enlevées dans le flowthrough. Après, l’ARN attaché est lavé avec la solution fournie A de lavage pour enlever des impuretés, et l’ARN purifié est élué avec la solution A. d’élution. Le kit épure toutes les tailles de l’ARN, de la grande ADN messagère et de l’ARN ribosomal vers le bas au microRNA (miRNA) et du petit ARN de intervention (siRNA). Des fractions d’ARN et d’ADN peuvent être éluées dans seulement 20 le  L, ayant pour résultat une concentration plus élevée des acides nucléiques. L’ARN purifié est du plus à haut niveau d’intégration et peut être employé dans un certain nombre d’applications en aval comprenant l’ACP en temps réel, l’ACP inverse de transcription, transfert de Northern, la protection de RNase et l’extension d’amorce, et les analyses de rangée d’expression. L’ADN genomic est du plus de haute qualité, et peut être employée dans des réactions d’ACP, ordonnançant, le transfert de Southern, des études de méthylation et l’analyse de SNP.

 

Avantages

  • L’ARN et l’ADN sont deux colonne épurée
  • L’ARN et l’ADN peuvent être élués dans seulement 20 le  L
  • L’ARN et l’ADN sont isolés dans un échantillon simple sans la division du lysate, ainsi

    réduction des résultats et de la variabilité contradictoires

  • Isolement séquentiel de l’ARN et de l’ADN d’un échantillon simple. Idéal pour de façon précieuse, difficile à

    obtenez ou de petits échantillons tels que le matériel de biopsie ou les foyers simples des cultures cellulaires.

  • Isolez l’ARN total et l’ADN genomic d’un échantillon simple en moins de 30 minutes
  • Protéinase supplémentaire K donnée pour des tissus fibreux de dur-à-extrait.
  • Toutes les tailles de l’ARN sont localisées, dans la grande ADN messagère vers le bas dans le microRNA
  • L’ARN et l’ADN purifiés sont du plus de haute qualité et peuvent être employés dans l’un certain nombre

    applications en aval

Conditions de stockage et stabilité de produit

Stockez la protéinase K à -20°C sur l’arrivée. Toutes autres solutions devraient être maintenues étroitement scellées et stockées à la température ambiante. Ces réactifs devraient rester stables pendant au moins 2 années dans leurs conteneurs non-ouverts.

 

Précautions et dénis de responsabilité

Ce kit est conçu pour des recherches seulement. On ne le prévoit pas pour l’usage humain ou diagnostique. Assurez-vous qu’un manteau approprié de laboratoire, des gants jetables et des protecteur de lunettes sont portés en travaillant avec des produits chimiques.

 

Le tampon SKP contient des sels de guanidinium, et devrait être manipulé avec soin. Guanidinium
sale les composés fortement réactifs de forme une fois combiné avec l’agent de blanchiment, ainsi le soin doit être pris pour avoir correctement l’un de ces solutions

 

Le sang de tous les sujets humains et animaux est considéré potentiellement infectieux. Toutes les précautions nécessaires recommandées par les autorités compétentes dans le pays de l’utilisation devraient être prises en travaillant avec du sang total.

 

Réactifs et équipement Client-fournis

Vous devez avoir le suivant afin d’employer la purification de RNA/DNA kit micro :

 

Pour tous les protocoles

  • microcentrifuge de Benchtop de 
  •   – mercaptoéthanol (facultatif)
  •  éthanol de 96 – de 100 %
  • l’eau de catégorie de biologie moléculaire de  (l’eau de Milli-Q®)
  •  
  • Pour les protocoles animaux de cellules
  •  PBS (sans RNase)

Pour le protocole de tissu animal

azote liquide de 

Mortier et pilon

    1. Travail avec de l’ARN

      RNases sont des enzymes très stables et robustes qui dégradent l’ARN. La stérilisation à l’autoclave des solutions et la verrerie n’est pas toujours suffisante pour éliminer activement ces enzymes. La première étape en préparant pour travailler avec de l’ARN est de créer un environnement sans RNase. Les précautions suivantes sont recommandées en tant que votre meilleure défense contre ces enzymes.

      • le  le secteur d’ARN devrait être situé à partir des postes de travail microbiologiques
      • le  propre, les gants jetables devrait être porté à tout moment en manipulant des réactifs, les échantillons,

        pipettes, tubes jetables, etc. On lui recommande que des gants soient changés fréquemment en

        évitez la contamination

      • le  là devrait être indiqué des solutions, des astuces, des tubes, des manteaux de laboratoire, des pipettes, etc. pour l’ARN seulement
      • le  toutes les solutions d’ARN devrait être préparé utilisant au moins 0,05% DEPC-traitées stérilisé à l’autoclave

        l’eau ou l’eau sans nucléase de catégorie de biologie moléculaire

      • le  nettoient toutes les surfaces avec les solutions disponibles dans le commerce de décontamination de RNase
      • le  en travaillant avec les échantillons épurés d’ARN, s’assurent qu’elles restent sur la glace pendant

        applications en aval